轻工学报

作者：刘晨, 王祯, 朱先约, 王文婷, 黄申, 翟玉俊

单位：1.甘肃烟草工业有限责任公司技术研发中心,甘肃兰州730050;2.郑州轻工业大学食品与生物工程学院,河南郑州450001

关键词：烟草, <i>C4H2</i>基因, 生物信息学, 原核表达载体, 黄酮

基金：烟草总公司重点科技研发项目（中烟办[2020]66号）；中烟实业科技项目（ZYSY-2019-12）

以中烟202无菌幼苗为供试材料克隆出C4H2基因的CDS区，对该基因进行生物信息学分析，构建原核表达载体，在大肠杆菌中对重组质粒进行诱导表达及纯化分析，考查其在不同组织中的表达特性，以及叶片中黄酮含量变化趋势。结果表明：1） NtC4H2蛋白属于细胞色素P450超家族成员，有1个跨膜区，为不稳定亲水蛋白，二级结构中α螺旋和无规则卷曲占比较高；2）重组NtC4H2蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在于表达细菌中；3）NtC4H2基因在烟草不同组织的表达水平为下部叶NtC4H2基因表达量有明显波动，48 h表达量达峰值，确定了该基因表达模式与叶中黄酮的积累呈正相关。

来源：2022年第1期

《轻工学报》期刊编辑部

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