轻工学报

作者：韩丽, 董滋强, 王丽娇, 李文钦, 王晨辉, 肖成志, 毛多斌

单位：1.郑州轻工业大学食品与生物工程学院,河南郑州450001;2.郑州轻工业大学烟草工业生物技术重点实验室,河南郑州450001

关键词：普通烟草, 酰基糖酰基转移酶, 蔗糖酯, 克隆, 表达与纯化

基金：中国烟草总公司重点研发项目(110202202006)

为获得具有活性的普通烟草酰基糖酰基转移酶(NtASAT2),采取生物信息学方法对其序列及结构进行分析和预测,并对其基因进行克隆、原核表达与纯化,通过酶催化反应对获得的重组蛋白进行功能验证。结果表明:在NtASAT2二级结构中,α-螺旋及无规则卷曲占比较大,分别为39.04%和41.13%,且NtASAT2的氨基酸序列与粘毛烟草NacASAT2高度相似;在原核细胞BL21(DE3)表达的重组蛋白中,可溶性NtASAT2含量较少,且NtASAT2与镍柱的亲和力较弱,纯化后仅得到少量目标蛋白;在含有底物的酶催化反应体系中,NtASAT2表现出酶活性并催化生成蔗糖二酯。该研究结果可为NtASAT2在酶催化合成蔗糖酯方面的应用提供理论参考。

来源：2025年第4期

《轻工学报》期刊编辑部

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